The Effect of Fungicides on Mycelial Growth and Conidial Germination of the Ginseng Root Rot Fungus, Cylindrocarpon destructans

Ginseng root rot caused by Cylindrocarpon destructans is the most destructive disease of ginseng. Six different fungicides (thiophanate-methyl, benomyl, prochloraz, mancozeb, azoxystrobin, and iprodione) were selected to evaluate the inhibitory effect on the mycelial growth and conidial germination of C. destructans isolates. Benomyl and prochloraz were found to be the most effective fungicides in inhibiting mycelial growth of all tested isolates, showing 64.7% to 100% inhibition at a concentration of 10 µg/mL, whereas thiophanate-methyl was the least effective fungicide, showing less than 50% inhibition even at a higher concentration of 100 µg/mL. The tested fungicides exhibited less than 20% inhibition of conidium germination at concentrations of 0.01, 0.1, and 1 µg/mL. However, the inhibition effect of mancozeb on condium germination of C. destructans was significantly increased to 92% to 99% at a higher concentration of 100 µg/mL, while the others still showed no higher than 30% inhibition.

Fungicide resistance and genetic variability in plant pathogenic strains of Guignardia citricarpa / Resistência a fungicidas e variabilidade genética em linhagens patogênicas de plantas Guignardiacitricarpa

Citrus black spot (CBS) is a plant disease of worldwide occurrence, affecting crops in Africa, Oceania, and South America. In Brazil, climate provides favorable conditions and CBS has spread to the Southeast and South regions. CBS is caused by the fungus Guignardia citricarpa (anamorph: Phyllosticta citricarpa) and its control is based on the use of fungicides, such as benzimidazoles. In South Africa, the disease was kept under control for 10 years with benomyl, until cases of resistance to high concentrations of this fungicide were reported from all citrus-producing areas. Azoxystrobin (a strobilurin) has been found effective in controlling phytopathogens, including CBS, in a wide range of economically important crops. The present study investigated in vitro the effects of the fungicides benomyl and azoxystrobin on 10 strains of G. citricarpa isolated from lesions in citrus plants from Brazil and South Africa. Benomyl at 0.5 µg/mL inhibited mycelial growth in all strains except PC3C, of African origin, which exhibited resistance to concentrations of up to 100.0 µg/mL. The spontaneous mutation frequency for resistance to benomyl was 1.25 ï 10-7. Azoxystrobin, even at high concentrations, did not inhibit mycelial growth in any of the strains, but significantly reduced sporulation rates, by as much as 100%, at a concentration of 5.0 µg/mL. Variations in sensitivity across strains, particularly to the strobilurin azoxystrobin, are possibly related to genetic variability in G. citricarpa isolates.

A Mancha Preta dos Citros (MPC) tem ocorrência mundial afetando a produção de citros na África, Oceania e América do Sul. No Brasil, onde o clima é favorável ao seu desenvolvimento, a doença está espalhada nas regiões Sul e Sudeste. O controle da MPC, causada pelo fungo Guignardia citricarpa (anamorfo: Phyllosticta citricarpa) é baseado na aplicação de fungicidas, como os benzimidazóis. Na África do Sul, após 10 anos de controle da doença com o fungicida benomil, os casos de resistência a altas concentrações deste fungicida atingiram todas as áreas produtoras. O fungicida estrolilurina chamado azoxistrobina tem se mostrado eficiente no controle dos fitopatógenos de uma grande variedade de culturas economicamente importantes, incluindo a MPC. Neste trabalho foram investigados os efeitos in vitro dos fungicidas benomil e azoxistrobina em 10 linhagens de G. citricarpa isoladas de lesões em plantas cítricas no Brasil e na África do Sul. Houve inibição do crescimento micelial a 0,5 µg/mL do fungicida benomil entre as linhagens testadas, com exceção de PC3C de origem sul-africana, que apresentou resistência até a concentração de 100,0 µg/mL de benomil. A freqüência de mutação espontânea para resistência ao benomil foi de 1,25 ï 10-7. A estrobilurina azoxistrobina, mesmo em altas concentrações, não inibiu o crescimento micelial dos isolados, entretanto reduziu significativamente a produção de esporos, chegando a 100% de inibição em concentrações de 5,0 µg/mL de azoxistrobina. A variação na sensibilidade das linhagens, principalmente com a estrobilurina azoxistrobina, possivelmente está relacionada com a variabilidade genética dos isolados de G. citricarpa.

Characterization of Fusarium oxysporum Isolated from Paprika in Korea

In the present study we first report in Korea the identification and characterization of Fusarium oxysporum isolated from rotten stems and roots of paprika (Capsicum annuum var. grossum) at Masan, Kyungsangnamdo in 2006. The fungal species produced white aerial mycelia accompanying with dark violet pigment on PDA. The optimal temperature and pH for the growth of the species was 25degrees C and pH 7, respectively. Microscopic observation of one of isolates of the species shows that its conidiophores are unbranched and monophialides, its microconidia have oval-ellipsoidal shape with no septate and are of 3.0~11 x 1.5~3.5 microm sizes, its macroconidia are of 15~20 x 2.0~3.5 microm sizes and have slightly curved or slender shape with 2~3 septate. The results of molecular analysis show that the ITS rDNA of F. oxysporum from paprika shares 100% sequence identity with that of known F. oxysporum isolates. The identified species proved it's pathogenicity by causing rotting symptom when it was inoculated on paprika fruits. The growth of F. oxysporum from paprika was suppressed on PDA by agrochemicals such as benomyl, tebuconazole and azoxystrobin. The identified species has the ability of producing extracelluar enzymes that degrade cellobiose and pectin.

Enhancement of growth of Lentinus crinitus in soil using benomyl and vegetable oil

In order to identify alternatives for soil fumigation in bioremediation process, the addition of benomyl and vegetable oil on the growth of L. crinitus and mitosporic fungi were evaluated. Benomyl can be used as an alternative to methyl bromide. Addition of vegetable oil favors the growth of L. crinitus.

Para identificar alternativas para a fumigação de solo em processos de biorremediação, foi avaliada a adição de benomil e de óleo vegetal no crescimento de Lentinus crinitus e fungos mitospóricos. Benomil pode ser usado como alternativa ao brometo de metila. A adição de óleo vegetal favoreceu o crescimento de L. crinitus.

[Investigation and measurement of pesticidal residues; benomil and mancazeb in cucumber produced in Mazandaran]

Considering the importance and usefulness of fruits in people's daily diet as they play an important role in determining public health and also considering the significance of pesticide residues in foods and fruits, measurement of which has been repeatedly reiterated by WHO and FAO, this research was done. Irregular use of pesticides by farmers knowingly or unknowingly without observing its caress period has led to the contact of these pesticides with humans through foods and fruits and in the long run, they will surely cause chronic complications. In this study, after collecting cucumbers form 76 sample regions, we rinsed them carefully, sliced them thinly and mashed them up. Then, we extracted them three times with n butyl acetate. Later, we evaporated the solvent. At the end, we measured the residue by chromatographic gas [GC] and detector [ECD]. The results obtained were analyzed with the help of two-way ANOVA. It indicated that there is a correlation between the investigated regions and the residual amount [P>0.05]. Calculation of the mean ratings showed that the levels of these two pesticides are higher than the acceptable level in most of the regions. [0.01]

Resíduos de Benomil em mamäo (Crica papaya L) tratado em pós-colheita / Benomyl residues in Papaya 9Carica papaya L) treated in post-harvest

Para avaliar os níveis de resíduos de Benomil em mamäo (Carica papaya L.), tratato em pós-colheita, utilizou-se Beniate 500 PM (250 mg/L., 500 mG/l e 1000 mG/L por imersäo em diferentes combinaçöes, com e sem o emprego de cera, totalizando oito tratamentos. Em seguida os mamöes foram armazenados a 12§C e 85-90 por cento de umidade relativa do ar (UR) durante 21 dias. Os níveis de Benomil foram analisados por cromatografia a líquido de alta eficiência com detector de ultravioleta (UV) a 286 nm, na polpa e na casca após 0, 1, 4, 7 e 21 dias de armazenamento. Näo foram detectados resíduos de Benomil na polpa de acordo com o limite de quantificaçäo do método (0,3 mg/kg), porém, níveis significativos foram detectados na casca, com degradaçäo na faixa de 55 por cento - 94 por cento entre 0 2 21 dias de armazenamento.

The nucleation of microtubules in Aspergillus nidulans germlings

Microtúbulos säo filamentos compostos por dímeros das tubulinas alfa e beta e têm uma variedade de funçöes nas células vivas. Em fungos, os corpúsculos polares dos fusos säo geralmente considerados os centros organizadores dos microtúbulos. Com o objetivo de contribuir para uma melhor compreensäo dos processos de nucleaçäo dos microtúbulos no fungo filamentoso A. nidulans, nós utilizamos a droga antimicrotúbulo Benomil em experimentos de bloqueio e liberaçäo para depolimerizar e repolimerizar os microtúbulos. Após 20 segundos de reincubaçäo em meio sem Benomil, pequenos microtúbulos foram formados a partir de pontos distribuídos pela célula, sugerindo que os pontos de nucleaçäo de microtúbulos säo aleatoriamente distribuídos pelas hifas de A. nidulans. Como em A. nidulans o movimento nuclear é dependente de microtúbulos foi analisado se mutantes defectivos na distribuiçäo de núcleos ao longo das hifas (mutantes nud) possuíam algum defeito evidente nos microtúbulos. Os microtúbulos citoplasmáticos, dos fusos e astrais estäo presentes e aparentam-se normais em todos os mutantes nud, mas foi observada uma pequena distorçäo na proporçäo de fusos mitóticos longos e curtos nestes mutantes, comparados com o controle. Isto sugere que alguns núcleos de mutantes nud näo alcançam a fase tardia da divisäo celular, em temperatura näo restritiva.

Induction of stable benomyl-tolerant phenotypic mutants of Trichoderma pseudokoningii MTCC 3011, and their evaluation for antagonistic and biocontrol potential.

Trichoderma pseudokoningii MTCC 3011 is a very useful strain for biological control of the plant pathogen Sclerotium rolfsii under post-harvest conditions. In the present investigation, several benomyl-tolerant phenotypic mutants of this strain have been generated using a two step mutagenesis-chemical followed by gamma irradiation. The mutants differed from the wild type strain in antibiotic and disease control potential. Some of the mutants are superior to the wild type in biocontrol potential on S. rolfsii.

Transformation of the entomopathogenic fungi, paecilomyces fumosoroseus and paecilomyces lilacinus (deuteromycotina: hyphomycetes) to benomyl resistence

The entomopathogenic fungi Paecilomyces fumosoroseus and P. lilacinus have been transformed to resistance to the fungicide benomyl by a polyethylene glycol (PEG)-mediated procedure using a mutant b-tubulin gene from Neurospora crassa carried on plasmid pBT6. Benomyl-resistant transformants of P. lilacinus were obtained that could tolerate greater than 30 µg/ml benomyl and P. fumosoroseus transformants were obtained that could tolerate 20 µg/ml benomyl. Following 5 serial passages of transformants on benomyl-containing media and 5 serial passages on non-selective media, 100 per cent of P. lilacinus transformants were found to be mitotically stable by a conidial germination test. In contrast, only 4 out of 9 transformants of P. fumosoroseus were mitotically stable. Southern blot analysis of genomic DNA from both species suggested that the mechanism of transformation in all transformants was by gene replacement of the b-tubulin allele. Non-homologous vector sequences were not detectable in the genomes of transformants.

Estudo dos níveis residuais de Benomil e Vamidotion em sucos processados de subprodutos de abacaxi (Smooth cayenne) / Study of residual levels of Benomil and Vamidotion in juices processed derivated of pineapple

Efetuou-se estudo dos níveis de resíduos de Vamidotion e Benomil em sucos obtidos nas diferentes etapas de processamento dos subprodutos do abacaxi (Smooth cayenne). Aplicaram-se Vamidotion (Kilval 0,25 por cento) e Benomil (Beniate 0,15 por cento) em abacaxi cultivado no campo. Após colheita as frutas foram divididas em dois grupos: näo lavadas e lavadas (100 ppm de hipoclorito). Extraiu-se o suco dos subprodutos dos abacaxis näo lavados, descartando-se a polpa e o bagaço. Após separaçäo da polpa e dos subprodutos dos abacaxis lavados extraiu-se o suco da polpa. Os sucos obtidos dos subprodutos foram submetidos a branqueamento (95 §C/min) e pasteurizaçäo (91,5 §C/30 s). Os resíduos de Vamidotion e Benomil foram analisados por cromatografia em fase gasosa (Detector Termoiônico Específico) e por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (detector uv/visível), respectivamente. Näo foi detectado Benomil em nenhuma amostra dentro do limite de quantificaçäo do método (0,1 mg/kg). Detectaram-se traços de Vamidotion no suco oriundo das frutas näo lavadas e 0,021 mg/kg no bagaço. De acordo com os resultados obtidos, todos os sucos (da polpa e subprodutos) e bagaço podem ser utilizados para consumo humano ou fabricaçäo de raçäo animal, respectivamente, conforme a legislaçäo brasileira de resíduos de pesticidas

Resíduos de benomil em polpas de mangas "haden" armazenadas em atmosfera modificada / Benomyl residues in \"Haden\" mangos pulps stored in modified atmosphere

Mangas tratadas pós-colheita por imersao em Benomil (1OOO mg/Kg) foram armazenadas a 13 graus Celsius e 95 ñ 5 por cento UR, com e sem modificaçao da atmosfera por O, 10 e 20 dias. Os frutos foram descascados e nas polpas, os resíduos de Benomil foram quantificados por cromatografia líquida de alta eficiência com detector de ultravioleta-visível a 286 nm. Nao foram detectados resíduos de Benomil em nenhum dos tratamentos, dentro do limite de quantificaçao do método (O,3 mg/Kg). Os resultados obtidos sugerem que a modificaçao da atmosfera nao exerceu influência sobre os níveis residuais de Benomil nas polpas de mangas.

Efecto de la aplicación secuencial de fungicidas sobre hongos formadores de micorrizas vesiculo-arbusculares en condiciones de campo / Effect of sequential application of fungicides on vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi in field conditions

Se estudió en condiciones de campo, el efecto de la aplicación secuencial de los fungicidas benomilo (sistémico) y mancozeb (de contacto) sobre la colonización vesículo-arbuscular en raíces de plantas de trigo y sobre la producción de esporas de hongos formadores de micorrizas vesículo-arbusculares. Estos fungicidas no afectaron la evolución de la colonización micorrizica de las raíces la cual siguió una curva sigmoide típica en todos los tratamientos; pero hicieron que variara la calidad de la misma, reduciendo el porcentaje de arbúsculos y aumentando el número de vesículas. Sin embargo la aplicación secuencial produjo una disminución del "plateau" de las curvas en las parcelas tratadas cuando se las compara con la testigo. El número de las esporas en el suelo no fue afectada por estos tratamientos

Estudo da influência de agrotóxicos sobre o desenvolvimento do Rhizobium leguminosarum biovar phaseoli / Study of the agrotoxics influence over the development of the Rhizobium leguminosarum biovar phaseoli

As bactérias fixadoras de nitrogênio atmosférico, via processo simbiótico, repassam N2 às leguminosas sob forma de amônia, proporcionando aumento na produçäo de alimentos protéicos, reciclagem biológica de nitrogênio do ar, evitando o alto custo da adubaçäo nitrogenada e o efeito potencialmente poluidor do nitrato lixiviado. Testou-se quatro estirpes de Rhizobium phaseoli frente a quatro fungicidas indicados para o tratamento de sementes de Phaseolus vulgaris L. (feijoeiro), no Estado do Rio Grande o sul (Brasil). Considerando-se as dosagens recomendadas dos fungicidas, houve crescimento bacteriano das quatro estirpes frente a Benomil e inibiçäo total frente a Captan; porém, para PCNB e Thiram, a resistência dependeu do tipo de estirpe. Observou-se que näo há influência de fungicidas sobre o desenvolvimento do Rhizobium phaseoli quando seleciona-se a estirpe adequada ao fungicida corretamente dosado.